elisa檢測試劑盒常見(jiàn)的10種測定問(wèn)題與解答 
elisa檢測試劑盒對于科研實(shí)驗人員來(lái)說(shuō)，不僅需要嚴格進(jìn)行說(shuō)明閱讀、依照elisa檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗操作，還需要強大的耐心與分析能力，而相對于即將畢業(yè)的科研人員來(lái)說(shuō)就更需要一份簡(jiǎn)單明了的elisa檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)或者相關(guān)老手來(lái)輔助進(jìn)行檢測試劑盒的操作了，下面原鑫生物關(guān)于elisa試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題羅列10點(diǎn)，以便相關(guān)實(shí)驗研究新手方便易懂。
問(wèn)題一 問(wèn)：elisa檢測試劑盒如何進(jìn)行預測定，實(shí)驗方案如何調整？ 答：為了保證測定結果的準確性，避免時(shí)間和材料的損失，正式試驗前務(wù)必取 2-3 個(gè)預期差異較大的樣本進(jìn)行預測定， 并制作標準曲線(xiàn)；根據預測定結果確認是否需要調整樣本量、提取過(guò)程中料液比是否需要調整、過(guò)程中料液比是否 需要調整、標準線(xiàn)性是否滿(mǎn)足要求等。預實(shí)驗結果評價(jià)過(guò)程中的任何問(wèn)題均可與專(zhuān)屬技術(shù)專(zhuān)員聯(lián)系。
問(wèn)題二 問(wèn)：elisa檢測試劑盒如何選擇合適的比色皿和微孔板？ 答：①通常采用玻璃或石英兩種材質(zhì)的比色皿：紫外分光光度法通常使用石英比色皿（口沿處有標有 Q），可見(jiàn)分光光 度法通常使用玻璃比色皿（口沿處有標有 G）。 ②按說(shuō)明書(shū)要求使用1 mL 玻璃/石英比色皿皿（光徑=1 cm）、200 μL 微量玻璃/石英比色皿（光徑=1 cm）、普通/UV微孔板（光徑=0.5 cm）。
問(wèn)題三
問(wèn)：elisa檢測試劑盒離心轉速和離心力如何設置? 答：說(shuō)明書(shū)中轉速有離心力（×g）和每分鐘轉速（rpm）兩種表示方式，具有自動(dòng)切換功能的可直接設定相應轉速 （rpm 或×g），若需要手動(dòng)轉換可參照下列公式計算：g=r*11.18*10^-6*rpm^2*注釋?zhuān)簉為有效離心半徑（即離心機軸心到樣品中心位置的長(cháng)度），單位厘米。
問(wèn)題四
問(wèn):elisa檢測試劑盒分光光度法和酶標儀法試劑盒能否通用？ 答：不可以通用，兩種試劑盒根據不同的檢測環(huán)境設計了相應的反應體系和試劑濃度，并按照標準流程進(jìn)行開(kāi)發(fā)和， 每種試劑盒均有相應的驗證數據，若用戶(hù)自行混用，公司將無(wú)法提供相應的技術(shù)支持。
問(wèn)題五
問(wèn)：elisa檢測試劑盒種試劑變色后還可以使用嗎？ 答：不可以，使用前需要注意觀(guān)察試劑顏色，若出現變色后則停止使用。
問(wèn)題六
問(wèn)：elisa檢測試劑盒按照說(shuō)明書(shū)冷藏后出現沉淀的試劑還可以用嗎？ 答：可以，試劑盒中含有濃度較高或過(guò)飽和試劑，低溫會(huì )導致溶解度下降進(jìn)而出現沉淀，建議將試劑恢復至室溫，振蕩 溶解后使用，若無(wú)法解決請及時(shí)與技術(shù)專(zhuān)員聯(lián)系。
問(wèn)題七
問(wèn)：elisa檢測試劑盒可以改變說(shuō)明書(shū)中加試劑順序嗎？ 答：不可以，否則可能造成反應不能正常進(jìn)行而導致測定失敗。
問(wèn)題八
問(wèn)：elisa檢測試劑盒吸光度特別高怎么辦？ 答：檢測吸光值應處于標準吸光值線(xiàn)性范圍內或符合說(shuō)明書(shū)注意事項中對最高吸光值的要求，若超出規定值應將待測 樣品進(jìn)行適當稀釋后再進(jìn)行檢測；也可聯(lián)系公司工作人員提供相應的技術(shù)支持。 特別注意：紫外分光光度法應使用石英比色皿，若吸光值異常高（吸光值≥3），則表明所使用的是玻璃比色皿或 普通酶標板，需進(jìn)行更換，同時(shí)檢查比色皿潔凈度和使用規范。
問(wèn)題九 問(wèn)：elisa檢測試劑盒為什么?A 會(huì )接近于零？ 答：①排除試驗異常情況且復測后?A 仍趨于零，表明反應不能發(fā)生：如果是測定酶活性，表明樣品可能沒(méi)有酶活性； 如果是測定某種物質(zhì)，則表明該樣品可能不含有此種物質(zhì)。 ②體系中還發(fā)生了其它干擾反應，該反應的底物或者 產(chǎn)物在該波長(cháng)下也有光吸收，并且變化方向相反，幾乎抵消了正常酶反應，可以通過(guò)設置新的對照排除。 ③樣品 保存不當造成預期指標發(fā)生改變，需仔細檢查樣品處理、采集和保存以及提取狀況。
問(wèn)題十
問(wèn)：elisa檢測試劑盒為什么?A 會(huì )出現負值？ 答：①可逆反應造成：可以通過(guò)適當縮短反應時(shí)間來(lái)防止逆反應的發(fā)生； ②體系中發(fā)生其它干擾反應：該反應的底物 或者產(chǎn)物在該波長(cháng)下也有光吸收，并且變化方向相反，超過(guò)了正常反應，可以通過(guò)設置新的對照排除。 ③反應體系 中存在不溶物或者氣泡：顆粒沉淀或者氣泡破裂后會(huì )導致吸光度顯著(zhù)下降，出現負值，顆粒通常來(lái)源于樣品粗提 液，可以提供再次離心，確保得到澄清的上清液；氣泡可能在反應體系中產(chǎn)生，可以通過(guò)降低反應速度。
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