丙酮酸（PA）含量檢測試劑盒 Pyruvic Acid (PA) Content Assay Kit 
丙酮酸含量檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品描述：
丙酮酸（Pyruvic Acid）是生物代謝及物質(zhì)轉化的重要中間體，可通過(guò)乙醛 CoA 和三羧酸循環(huán)實(shí)
現體內糖、脂肪和氨基酸間的相互轉化，在營(yíng)養物質(zhì)代謝過(guò)程中起著(zhù)重要的樞紐作用。丙酮酸分子中
同時(shí)具有羰基和羧基兩個(gè)官能團，除具有羧酸和酮的性質(zhì)外，還具有 α-酮酸的性質(zhì)，作為一種基本化
工原料在化學(xué)、制藥、食品、農業(yè)及環(huán)保等領(lǐng)域具有廣泛應用。
丙酮酸能夠與 2,4-二硝基苯肼反應生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在堿性溶液中進(jìn)一步被氧化為棕
紅色物質(zhì)，產(chǎn)物在 520 nm 處具有特征吸收峰，通過(guò)吸光值的變化即可定量檢測丙酮酸的含量。
丙酮酸含量檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品內容圖示： 
丙酮酸含量檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品使用說(shuō)明： 測定過(guò)程中所需要的儀器和試劑：可見(jiàn)分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調式移液器、臺式離心機和蒸餾水。 ①組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱(chēng)取 0.1 g 組織，加
入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，室溫靜置 30 min，8000 g 常溫離心 10 min，取上清待測。 ②細菌或細胞：離心收集細菌或細胞到離心管內，按照細菌或細胞數量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細菌或細胞加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 20%，超聲 3 s，間隔 10 s，重復 30 次），室溫靜置 30 min，8000 g 常溫離心 10 min，取上清待測。 ③血清（漿）、培養液等液體樣本：按照樣本體積（mL）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比
例（建議 0.1 mL 液體樣本加入 1 mL 提取液）處理樣本，充分混勻后室溫靜置 30 min，8000 g 常溫離
心 10 min，取上清待測。
丙酮酸含量檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)測定步驟說(shuō)明:
①分光光度計/酶標儀預熱 30 min 以上，調節波長(cháng)至 520 nm，蒸餾水調零。 ②在 96 孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列試劑。 
吸光值測定：測定 520 nm 處吸光值，記為 A 測定、A 標準和 A 空白，計算?A 測定=A 測定-A
空白，?A 標準=A 標準-A 空白。注：空白組只需測定 1-2 次。
標準曲線(xiàn)的建立：以 100、50、25、12.5、6.25、3.125 μg/mL 為橫坐標（x），以其對應的?A 標準
為縱坐標（y），繪制標準曲線(xiàn)，得到標準方程 y=kx+b，將?A 測定帶入公式中得到 x（μg/mL）
丙酮酸含量檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)丙酮酸含量計算圖示： 
注釋?zhuān)篤 樣：反應體系中加入待測樣本的體積，75 μL=0.075 mL；V 提：待測樣本總體積，1 mL；
V 液：液體樣本的體積，0.1 mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；細菌或細胞數量：
以萬(wàn)計。
丙酮酸含量檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)注意事項 ①血液樣本抗凝劑建議使用肝素鈉-氟化鈉，抗凝血樣品置于冰浴中送檢，盡快分離血漿。 ②若 ΔA 測定超出標準線(xiàn)性吸光范圍，建議適當增加樣本（低于標準下限）或適當稀釋?zhuān)ǜ哂跇?
準上限）后再進(jìn)行測定，計算時(shí)相應修改。
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